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唾液酸酶基因重组表达载体及其构建方法,唾液酸酶及其制备方法
王少露; 贺丽生; 王勇
Rights Holder中国科学院深海科学与工程研究所
Application Date2018-04-28
2018-10-18
Application NumberPCT/CN2018/085049
Open (Notice) NumberWO2018188672A1
Abstract提供了一种唾液酸酶的制备方法,包括如下步骤:制备唾液酸酶基因片段;将唾液酸酶基因片段克隆到pMD-18T中,得到连接产物,将连接产物转化E.coli JM109,挑选阳性克隆子测序,获得如SEQ ID NO:1所示的基因序列;将阳性克隆子和原核表达载体连接,得到重组表达载体;将重组表达载体转化得到重组工程菌;对重组工程菌进行发酵诱导表达、纯化,得到唾液酸酶。还提供了上述唾液酸酶的制备方法,通过细菌基因组DNA的提取、PCR扩增、构建重组表达载体、转入宿主细胞构建重组表达细胞、重组表达细胞的培养及诱导表达、从培养的宿主细胞中分离、纯化蛋白酶,蛋白酶酶学性质的分析。
Claim1.一种唾液酸酶基因重组表达载体的构建方法,其特征在于,包括以下步骤: 制备唾液酸酶基因片段; 将所述唾液酸酶基因片段克隆到pMD-18T中,得到连接产物,将所述连接产物转化E.coli JM109,挑选阳性克隆子测序,获得如SEQ ID NO:1所示的基因序列; 将所述阳性克隆子和原核表达载体连接,得到所述唾液酸酶基因重组表达载体。
Country世界知识产权组织
Language英语
Agency-
Other Abstract-
IPC Classification NumberC12N15/70
CPC Classification NumberC12N15/70 ; C12N15/66 ; C12N9/24
Subtype发明专利
Document Type专利
Identifierhttp://ir.idsse.ac.cn/handle/183446/7290
Collection研究生部
深海科学研究部_深海生物学研究室_深海生物蛋白质组学及分子生物学研究组
深海科学研究部_深海生物学研究室_深海微生物基因组学研究组
Affiliation中国科学院深海科学与工程研究所
Recommended Citation
GB/T 7714
王少露,贺丽生,王勇. 唾液酸酶基因重组表达载体及其构建方法,唾液酸酶及其制备方法[P]. 2018-10-18.
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